Techniques Immunologiques utilisant les anticorps 2ème année - Février/mars 2012 ED n°1

Techniques Immunologiques utilisant les anticorps 2ème année - Février/mars 2012 ED n°1 : Immunoenzymologie - ED préparatoire TP n°2 (Benjamin Bertin) ED n°2 : Précipitation / Agglutination - ED préparatoire TP n°3 (Christophe Carnoy) ED n°3 : Immunofluorescence (Emmanuel Hermann) Structure de base d'une immunoglobuline zone de fixation de l'antigène (paratope) exemple IgG (structure H2L2) Ntal V chaîne légère (L) L Ntal V H C L C H S 1 Ctal S CH2 CH3 Ctal chaîne lourde (H) CH2 CH3 Ctal chaîne lourde (H) SS SS charnière S 1 CH S Ctal Ntal zone de fixation de l'antigène (paratope) CL VH VL Ntal chaîne légère (L) Un anticorps est une molécule bivalente !! Caractéristiques de la liaison Ag-Ac Spécificité: capacité d'un Ac à reconnaître un seul déterminant antigénique (épitope) Sensibilité: capacité à détecter de faibles quantités d'antigènes Affinité: force des interactions entre un seul site de fixation de l'antigène (le paratope) et un seul épitope Avidité: stabilité du complexe Ag-Ac Réaction croisée: 2 antigènes différents partagent un même épitope ou deux épitopes apparentés reconnus par le même anticorps Ac polyclonaux: obtenus après immunisation par un antigène reconnaissance de différents épitopes, monspécifiques ou polyspécifiques, haute affinité, hétérogènes Ac monoclonaux: obtenus à partir d'un seul clone de LB immortalisé monospécifiques (un seul épitope reconnu), purs, grande quantité Immunoenzymologie FCB 3ème année - 2011/2012 L'immunoenzymologie Technique puissante couramment utilisée en recherche et en en diagnostic diagnostic Basée sur la très grande spécificité des anticorps pour leurs des antigènes antig Test qualitatif Détection de protéines après électrophorèse : Western-blot Détection de protéines sur une coupe histologique Test quantitatif Dosage d'antigènes D...