Techniques Immunologiques utilisant les anticorps
Publié le 03/04/2019
Extrait du document
Dosage d'antigènes en phase hétérogène
1. Méthode ELISA compétition (Enzyme Linked Immunosorbent Assay)
Compétition à l'Ag marqué
Ag recherché de petite taille (hormones, médicaments)
Ac I fixé
E
Ag marqué (quantité fixe)
Ag à doser (non marqué; quantité variable)
E
E
O Réalisation d'une courbe d'étalonnage avec des solutions d'Ag de concentrations connues
O Dosage avec le sérum du patient. Détermination de la concentration d'Ag contenu dans le sérum àl'aide de la courbe étalon
[Ag] non marqué ng/ml
étection d'antigène: Western-blot
- Détection de protéines
- Détermination du poids moléculaire
From Molecular Cell Biology by Harvey Lodish et al. http://www.life.umd.edu/classroom/bsci423/song/Lab12.html
Etape 1: séparation des protéines selon leur poids moléculaire
SDS-PAGE : Sodium Dodécylsulfate-PolyAcrylamide Gel Electrophoresis
« Structure de base d’une immunoglobuline chaîne lourde (H) chaîne lourde (H) C H2 C H2 C H3 C H3 CH1 VH VH exemple IgG (structure H 2L2) Ctal C H1 Ctal S S S S S S SS Ntal Ntal chaîne légère (L) CL VL Ntal Ctal chaîne légère (L) C L VL Ntal Ctal zone de fixation de l’antigène (paratope) zone de fixation de l’antigène (paratope) charnière. »
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