PRINCIPALES TECHNIQUES DE BIOLOGIE MOLÉCULAIRE ET EXEMPLES D'APPLICATION AU DIAGNOSTIC.
Publié le 25/09/2012
Extrait du document
E. La PCR ASO.
1/ Principe
- "Allele-Specific Oligonucléotide hybridisation".
Technique permettant de détecter et d’identifier des mutations connues.
Ceci avec une sonde spécifique de la région portant la mutation.
- PCR pour amplifier la région à étudier.
- Dépôt sur deux membranes des produits de PCR.
- Dénaturation.
- Hybridation de chacune des deux membranes avec une sonde marquée reconnaissant
l’allèle muté ou l’allèle sauvage.
- Lavages.
- Révélation.
La sonde normale reconnaît spécifiquement l’allèle normal et la sonde mutée l’allèle muté.
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