ED1 Enzymologie
Publié le 02/04/2019
Extrait du document
Exercice n°3:
Un enzyme catalyse la réaction : S ---> P
La cinétique de formation de P est déterminée pour différentes concentrations de substrat. La formation du produit P est mesurée par spectrophotométrie en suivant l'augmentation de l'absorbance à 420 nm.
Le tableau rapporte les vitesses initiales (Vi) de la réaction pour différentes concentrations en substrat.
4 [S] en mol.L-1 8,13 x10-4 5,70 x10-4 4,90 x10-4 4,10 x10-4 3,25 x10-4 2,44 x10-4
1 1 Vi en mol.L-1.min-1 1,85 x10-5 1,59 x10-5 1,47 x10-5 1,34 x10-5 1,17 x10-5 0,97 x10-5
Déterminer la Vmax et le Km du couple enzyme-substrat. Pour cela, veuillez vous aider du tableau ci-dessous etdu repère (axes) fourni page suivante.
1/[S] en L.mol-1
4 1/Vi en L.min.mol-1
Exercice n°2:
On effectue une mesure de l'activité enzymatique sur une prise d'essai de 1 mL d'une solution A. On trace la courbe NP=f(t) : nombre de moles de produit P formé dans le milieu réactionnel en fonction du temps d'incubation (courbe A).
Nombre de moles de P formé dans le milieu réactionnel x10-6
1. Que représente la droite DA?
2. En donner la définition.
3. Indiquer la durée d'incubation maximale pour une bonne mesure de l'activité enzymatique.
4. Donner la valeur de la vitesse initiale Vi pour la courbe A.
Combien de fois faut-il augmenter la concentration en substrat pour passer d'une vitesse de réaction de 0,1 Vmax à 0,9 Vmax pour une enzyme suivant le modèle de Michaelis -Menten ?
A. 9 fois
B. 18 fois
C. 81 fois
D. 162 fois
«
Exercice n°1:
La pénicilline est hydrolysée et par conséquent rendue inactive par la pénicillinase, un
enzyme présent dans certaines bactéries résistantes à cet antibiotique . La masse
moléculaire de cet enzyme extrait de Staphylococcus aureus est de 29 600 Da . On fait
agir cet enzyme sur des quantités variables de pénicilline et on mesure expérimentalement
le taux de dégradation de l’antibiotique .
1. La cinétique de la pénicillinase est – elle michaélienne?
2.
Quelle est la valeur du Km?
3.
Quelle sera la valeur de la vitesse de réaction pour une quantité de substrat = 1,0 x 10 -4
mol.
L -1?
4.
Quelle sera la valeur de la vitesse de réaction pour une quantité de substrat = 1,0 x 10 -4
mol.
L -1si on double la quantité d’enzyme?Pénicilline
(x 10 -5 mol.
L -1)
Taux d'hydrolyse de la pénicilline
(x 10 -9 mol.min -1)
0,1 0,11
0,3 0,25
0,5 0,34
1,0 0,45
3,0 0,59
5,0 0,60.
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