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Préparation de deux solutions physiologiques

Publié le 04/02/2013

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TP -1- : Solution physiologique: Préparation, Contrôle du pH, du pouvoir tampon et de l'osmolarité . Buts : * Préparation de deux solutions physiologiques : - Earle glucosée, tamponnée à l'hydrogénocarbonate de sodium - Earle glucosée, tamponnée à l'HEPES * Comparaison de l'effet des tampons utilisés en fonction du pH Introduction Une solution physiologique est une solution préparée artificiellement et ayant une composition proche de celle du plasma sanguin. La principale utilisation d'une solution physiologique est pour préserver les fonctions des organes, tissues ou cellules prélevés d'un organisme dans le but d'effectuer par la suite des études physiologiques, des greffes ou des cultures cellulaires. De plus, les solutions physiologiques sont également utilisées comme thérapies médicales. Par exemple, une solution physiologique peut être employée pour nettoyer les plaies ou pour réhydrater le corps en cas de pertes excessives d'eau et de sels suite à une déshydratation comme dans le cas de diarrhée. La maintenance des fonctions des organes, tissus ou cellules est due au faite que les solutions physiologiques assurent l'isotonicité du milieu qui est indispensable à la préservation de la structure physiologique en question car elle présente une osmolarité proche de celle des fluides corporels. L'isotonicité d'une solution physiologique qui dépend de la composition ionique n'est pas le seul paramètre à prendre en considération lors de la préparation de la solution mais aussi ; la valeur du pH qui doit être neutre et plus précisément de l'ordre de 7.4, la température, la source de carbone qui est le plus souvent le glucose et les conditions d'oxygénation sont d'une importance égale. Les solutions physiologiques artificielles sont généralement composées d'eau distillée, de chlorure de sodium, de chlorure de potassium, de chlorure de calcium, de chlorure de magnésium, d'hydrogénophosphate de sodium, de glucose comme source d'énergie et d'un tampon comme l'hydrogénocarbonate de sodium ou l'acide 4-(2-hydroxyéthyl)-1-pipérazine éthane sulfonique connue par HEPES. Le lactate de Ringer, le PBS (Phosphate Buffered Saline), l'Earle glucosée tamponnée à l'hydrogénocarbonate de sodium ou à l'HEPES sont des exemples de solutions physiologiques. Matériels et méthodes Matériels Béchers Spatule Papier aluminium Agitateur magnétique Balance Compte-goutte pH mètre Produits chimiques Chlorur...

« ­ Balance ­ Compte-goutte ­ pH mètre Produits chimiques ­ Chlorure de sodium ­ Chlorure de potassium ­ Chlorure de calcium ­ Chlorure de magnésium ­ Hydrogénophosphate de sodium ­ Glucose ­ Hydrodrogénocarbonate de sodium ­ HEPES ­ Eau distillée ­ Acide chlorhydrique 0.1 N ­ Hydroxyde de sodium 0.1 N Méthodes 1- Dans deux béchers, ajouter les produits suivant à 50 ml d’eau distillée : Bécher 1 : Earle glucosée, tamponnée à l’hydrogénocarbonate de sodium Produits Concentration (mM) Concentration (M) Masse (g) NaCl 130 0.13 1.52 KCl 5 0.005 0.074 CaCl 2 2 0.002 0.044 MgCl 2 1 0.001 0.019 NaH 2 PO 4 1 0.001 0.024 Glucose 11 0.011 0.4 NaHCO 3 10 0.01 0.17 Bécher 2 : Earle glucosée, tamponnée à l’HEPES Produits Concentration (mM) Concentration (M) Masse (g) NaCl 130 0.13 1.52. »

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